对于很多用流式细胞仪检测细胞周期的人来说最痛苦的应该就是明明检测结果已经出来了,可是却看不懂是什么意思。
今天小编就用3张图跟大家一起学习分析流式细胞周期结果:
Fig.1.流式细胞周期结果图
一、首先得搞清楚检测报告最直观的几个内容:
1、纵坐标Cell Number:即计数的有效细胞数;
2、横坐标DNA Content:即DNA含量;
3、G1、G2、S三期在图中已经标示;
4、右侧数字含义:Dip G1-53.84% at 55.56,即G1期DNA含量平均值为55.56;53.84%即G1期细胞数占总数的53.84%;Dip G2-5.64% at 107.72,即G2期DNA含量平均值为107.72,5.64%即G2期细胞数占总数的5.64%;以此类推…
二、流式细胞周期结果图的意义,主要从细胞周期的角度看各参数的意义:
1、细胞周期指由细胞分裂结束到下一次细胞分裂结束所经历的过程,所需的时间叫细胞周期时间。
Fig.2.细胞周期的四个阶段
① G1期(gap1),指从有丝分裂完成到期DNA复制之前的间隙时间;
② S期(synthesis phase),指DNA复制的时期;
③ G2期(gap2),指DNA复制完成到有丝分裂开始之前的一段时间;
④ M期又称D期(mitosis or division),细胞分裂开始到结束。
2、从增殖的角度来看,可将高等动物的细胞分为三类:
①连续分裂细胞,在细胞周期中连续运转因而又称为周期细胞,如表皮生发层细胞、部分骨髓细胞。
②休眠细胞暂不分裂,但在适当的刺激下可重新进入细胞周期,称G0期细胞,如淋巴细胞、肝、肾细胞等。
③不分裂细胞,指不可逆地脱离细胞周期,不再分裂的细胞,又称终端细胞,如神经、肌肉、多形核细胞等等。
细胞周期的时间长短与物种的细胞类型有关,如:小鼠十二指肠上皮细胞的周期为10小时,人类胃上皮细胞24小时,骨髓细胞18小时,培养的人成纤维细胞18小时,CHO细胞14小时,HeLa细胞21小时。不同类型细胞的G1长短不同,是造成细胞周期差异的主要原因。
3、流式细胞结果图各参数的意义:
Fig.3.细胞周期中各个环节在流式细胞仪上分析时的图谱特征
常用的流式细胞术分析细胞周期的方法是依据细胞DNA含量(横坐标)来分析的:
G1期:DNA复制还没开始,也是DNA含量最少的,即流式检测结果图的第一个峰;
S期:DNA开始复制,到完成复制,是一个一倍DNA到二倍DNA的过程,在流式结果图中显示期跨度特别大(第二个不高但很宽的峰);
G2期:DNA复制完成至分裂的一段时间,此时细胞内含二倍DNA,在流式结果图中的第三个峰;
M期:细胞分裂过程,此时细胞内也是二倍DNA,用DNA含量的方法是无法与G2期分开,所以有第三峰明显升高时报告:G2/M期阻滞。
OK!看完这几张图,小编终于明白细胞周期的结果图中各个参数的意义了,也知道怎么分析比较不同的处理对周期的影响作用了。
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