如何证明转录因子A与p53的promoter区域结合?
通过Luciferase实验证实转录因子A能够激活p53的启动子区域,那么如何证明转录因子A能与p53的promoter区域结合呢?,这就需要用到ChIP。今天我们介绍下ChIP的原理,一张图让你明白ChIP原理。
我们来看看ChIP的原理:
在正常情况下,一些蛋白质和DNA结合并影响DNA的功能,但是这种结合有强结合和弱结合,强结合的如组蛋白,弱结合的为一些转录因子,通过甲醛处理让生理状态下DNA与蛋白质相结合的交联在一起,然后通过酶和超声将染色质消化为小片段,利用抗原抗体的特异性识别反应,使用目的蛋白特异性多克隆抗体将与目的蛋白相结合的DNA片段沉淀下来。ChIP主要包括细胞固定交联,染色质断裂,染色质免疫沉淀,解交联,DNA纯化,以及DNA的鉴定。
每次听到ChIP这个词,科研狗总是想起了薯条:
不说了,去吃薯条了
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