对于凋亡细胞的检测，皱缩、变形、空泡化，抑或裂解为凋亡小体，都逃不过光学倒置显微镜的火眼金睛。

       吉姆萨染色、瑞氏染色等两位“助攻”齐上阵，将凋亡细胞的染色质浓缩、边缘化，核膜裂解、染色质分割成块状等典型形态一展无遗，以确保没有漏网之鱼。

       吉姆萨染液由天青，伊红组成。染色原理和结果与瑞特染色法基本相同。嗜酸性颗粒为碱性蛋白质，与酸性染料伊红结合，染粉红色，称为嗜酸性物质。对细胞着色后便于观察，方便对凋亡细胞做出检测判断。

       PH对细胞染色有一些影响。细胞里各种成分均不蛋白质，因为蛋白质系两性电解质，带电荷随溶液PH而定，在偏酸性环境里正电荷增多，易和伊红结合，染色为偏红；在偏碱性环境里负电荷增多，易和美蓝或天青结合，染色偏蓝。

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       1.将显影的玻片置于玻片架上，浸入盛有水的染色盘中。

       （1）1个盘：pH6.8 10 mmol/l 磷酸钠缓冲液，所配的25倍稀释的吉姆萨染液。

       （2）3个盘：水。

       （3）脱水系列溶液：

        ①3个盘：分别盛50%、70%和95%乙醇。

        ②2个盘：盛有100%乙醇。

        ③3个盘：盛有二甲苯。

       2.在25倍稀释的吉姆萨染液中染玻片20 s（依染色时间决定染色的强弱），将玻片在水中浸泡3次，每次2 min。

       3.连续用乙醇脱水系列溶液处理，每盘中浸泡2 min，将玻片移至二甲苯盘中，毎次浸泡2 min，共3次。

       4.在通风橱中，按如下操作压片固定：用一平头镊（拿在左手），从二甲苯中取出一块玻片，夹住磨面端置水平。加4滴Permount 的于另一端（切片所处位置），左手拿一干净的盖玻片，很缓慢地放在载玻片上（在加压片固定介质和盖玻片前，勿使玻片变干，因微小气泡会造成人为假象）。

       5.用3MM 滤纸，沿盖玻片边缘，小心吸去多余固片介质/二甲苯，并擦拭载玻片背面（勿擦拭盖玻片）。

       6.将玻片平放于一硬纸盒盘上，置42℃温孵箱2天使之凝固。

       7.以剃须刀片小心刮去载玻片背面残留胶乳，染料及固片介质。用镜头纸或普通棉纸擦去尘埃。放入玻片盒，必要时，载玻片上再注明标签。

       8.显微镜观察玻片，观察时可依信号强弱，调节光亮。

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       ▲1.勿将玻片直立存放于玻片中，因此时固片介质尚未凝结。

       ▲2.细胞染色对氢离子浓度十分敏感，染色用正经片一定清洁，要无酸碱污染。

       ▲3.配制顼特液一定用优质甲醇，稀释染色一定用缓冲液，冲洗一定用水应近中性，不然可导致各种细胞染色反应异常，以致于识别困难，甚至造成错误的。