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大肠杆菌感受态
发布时间:2015-10-31 | 浏览:7267次 【关闭此页


大肠杆菌感受态列表

BL21(DE3)chemically Competent Cell   

       产品特点:BL21菌株用于以T7 RNA聚合酶为表达系统的高效外源基因的蛋白表达宿主。T7噬菌体RNA聚合酶基因的表达受控于λ噬菌体DE3区的lacUV5启动子,该区整合于BL21的染色体上。该菌适合于非毒性蛋白的表达


DH5α Chemically Competent Cell   

       产品特点:大肠杆菌DH5α是一种常用于质粒克隆的菌株,在使用pUC系列质粒载体转化时,可与载体编码的β-半乳糖苷酶氨基端实现α-互补。可用于蓝白斑筛选鉴别重组菌株


STBL3 Chemically Competent Cell   

       产品特点:STBL3感受态细胞是慢病毒载体系统推荐使用的菌株,可有效抑制长片段末端重复区的重组,降低错误重组的概率


Top 10 Chemically Competent Cell        

       产品特点:TOP10感受态细胞是一种常用于质粒克隆的菌株,适用于高效的质粒DNA克隆并能保证高拷贝质粒的稳定复制


使用方法:

      1 从-70℃ 超低温冰箱中取出一管感受态菌,冰浴10 min使其解冻;

       2 加入适量目的质粒DNA,冰浴30 min;

       3 插入42℃水浴中90S进行热休克,然后冰浴5 min;

       4 加入0.7ml无抗LB培养基(培养基预热至37℃),然后37℃ 160-180rpm/min震荡培养45-60min;

       5 取上述转化混合液100-300μl,在含合适抗菌素的固体LB平板培养皿上用玻璃涂布棒涂布均匀;

       6 *如果载体和宿主菌适合蓝白斑筛选的话,滴完菌液后再在平板上滴加40μl 2% X-gal,8μl 20% IPTG,涂布均匀;

       7 放入37℃恒温培养箱倒置培养过夜;

       8 观察平板上长出的菌落克隆

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